Estos indicadores confirman la presencia o ausencia de microorganismos después del proceso de esterilización.  Para autoclaves se utilizan esporas de Bacillus Stearothermophilus.

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Según la Norma General Técnica N° 199 sobre esterilización y desinfección de alto nivel y uso de árticulo médico estériles, la validación de los procesos de esterilización de realiza a través de:

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1. Indicadores de proceso del equipo: evalúa las condiciones de funcionamiento, habitual del equipo, tales como: monitores físicos o paramétricos (ejemplo: temperatura, presión, tiempo); microprocesadores: test de Bowie-Dick.

2. Indicadores químicos: evalúan la exposición del material al agente esterilizante y, a la vez, informan al usuario sobre qué método ha sido usado, tales como uniparámetros; multiparámetros; integrados, emuladores.

3. Indicadores biológicos: son considerados como uno de los principales indicadores de la condición de esterilidad. Al verificar la eliminación de esporas bacterianas altamente resistentes, corresponden a un medio indirecto de confirmación de la presencia o ausencia de microorganismos viables tras la exposición al agente esterilizante y, por lo tanto, de su efectividad. De acuerdo al tiempo requerido para su lectura se distinguen en convencionales y de lectura rápida.

La evaluación de los ciclos y el proceso considerará el resultado de los tres tipos de indicadores en forma conjunta, por lo que para monitorizar el proceso de exposición al agente se requerirá utilizar siempre al menos un indicador de cada uno de los tipos mencionados.